生物酶“联手”大肠杆菌 破解尼龙单体合成污染困难

光山新闻网 林晓舟 2020-10-27 11:50:30
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  生物酶“联手”大肠杆菌 破解尼龙单体合成污染困难

  尼龙是一种应用很是遍及的合成纤维,尼龙种类较多,个中尼龙66是最重要的一种。尼龙66的主要原料之一己二酸属于二元羧酸类尼龙单体,其合成主要依赖高污染、高能耗的多步调化学氧化进程。

  湖北大学生命科学学院、省部共建生物催化与酶工程国度重点尝试室李爱涛传授团队,设计了一条全新的人工生物合成途径,通过理性设计微生物菌群催化体系,用氛围中的氧作为氧化剂,在水溶液中把环烷烃或环烷醇转化为相应的二元羧酸尼龙单体。这一研究成就有望办理困扰科学界和家产界近半个世纪的困难,相关论文10月7日在线颁发于《自然·通讯》。

  化学法合成尼龙单体,污染情况受制约  

  尼龙是聚酰胺的俗称,是世界上呈现的第一种合成纤维,它的合成不只是纤维合成家产的重大打破,同时也是高分子化学的一个重要里程碑。

  尼龙的种类较多,凭据单体的布局可以分为脂肪族、芬芳族以及脂肪-芬芳族尼龙,个中脂肪族尼龙中的尼龙66是最重要的一种,被大量遍及地应用到浩瀚干系国计民生的重要规模,如纺织打扮、医药卫生、农业食品、物流运输及军事国防等。

  “尼龙66是由己二酸与己二胺缩合制得,而己二酸作为个中主要的单体,其合成主要依赖高污染、高能耗的多步调化学氧化进程。”李爱涛先容,该进程需要利用大量具有腐化性的硝酸,同时发生大量的一氧化氮、一氧化二氮等有害温室气体,带来全球气候变暖、臭氧空洞等情况问题,因此严重制约着尼龙66财富的成长。

  针对上述问题,近几十年来,科学家们一直在摸索该类尼龙单体高效、绿色的新合成要领与工艺。譬喻,近期德国阿尔伯特-爱因斯坦大学的马蒂亚斯·贝勒传授团队在《科学》杂志上颁发论文称,他们发现了一种全新工艺,不需要硝酸就可以出产己二酸,即回收钯金属催化体系实现了丁二烯双羰基化一步制成己二酸酯。然而,该体系仍存在必然的范围性,好比催化剂不变性差、本钱高以及贵金属接纳坚苦等,限制了其进一步的家产化应用。

  3种大肠杆菌表达8种酶,得到菌群催化剂

  跟着合成生物技能的成长,人工设计的多酶级联催化,可以将多种具有差异催化活性的酶催化剂放在同一个回响体系中,在温和且情况友好的条件下将便宜易得的原料,通过一锅多步法合成人类需要的高附加值产物。

  另外,假如直接操作表达多种酶的细胞作为催化剂,在体内催化方针回响,可以制止酶的疏散纯化以及昂贵辅酶的添加,从而大大低落出产本钱。基于这些原因,从新设计细胞催化剂实现体内方针级联催化回响得到了遍及的存眷。

  而将该要领用于己二酸的合成,有望办理困扰科学界和家产界几十年来的困难。为了实现这一方针,李爱涛团队从新设计了一条含8个酶的生物合成途径,期望在同一个回响体系中颠末级联催化把环己烷转化为己二酸。

  研究人员实验将8种酶在同一个细胞中举办表达来构建细胞催化剂,发明由于细胞承担太重,某些酶在细胞内的表达量很低,导致整个回响的催化效率很差。为了办理上述问题,他们将8种酶分手到3种大肠杆菌中举办表达,首先得到三种具有差异催化成果的细胞催化剂,然后再将三种细胞举办组合得到菌群催化剂。通过任务分工、团队协作的方法,最终实现了环己烷到己二酸的高效绿色合成。

  该进程在温和条件下(常温、常压和水相)举办催化回响,利用自给自足的辅酶自轮回,不需要任何外源的昂贵辅酶,本钱低。同时回响进程没有任何中间产品的积聚,选择性高、产品单一,后续疏散纯化简朴。